重组表达质粒pcDNA3/HIF-1α的构建及其在人肝癌细胞株HepG2的稳定表达

• 作者: 严斌 刘炯 曾少波 江斌 菅志远 赵艳梅
• 来源期刊: 郧阳医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: HepG2 缺氧诱导因子 基因转染
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 125-127,封2
• 页数: 4页
• 分类号: Q754
• 字数: 2189字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建缺氧诱导因子(HIF-1α)基因的表达质粒,经脂质体转染人肝癌细胞株HepG2,建立稳定表达HIF-1α基因的细胞模型,为肝癌研究提供有效工具.方法:采用RT-PCR方法扩增肝癌细胞株HepG2内HIF-1α基因功能区片段,克隆至真核表达载体pcDNA3上,转染HepG2细胞后,经G418筛选,建立稳定表达HIF-1α基因的细胞株,免疫荧光染色和Western-blot分析HIF-1α蛋白的表达.结果:通过酶切鉴定,凝胶电泳分析,两条带大小分别位于5.3 kb和2.55 kb,与预期结果符合,序列测定证实HIF-1α与GeneBank公布的序列一致.经脂质体包裹转染HepG2后,免疫荧光染色和Western-blot分析证实HIF-1α蛋白的表达明显上调.结论:经脂质体途径成功构建稳定表达HIF-1α的细胞模型,为肝癌研究提供了一个有效的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵艳梅	郧阳医学院附属太和医院普通外科	10	25	3.0	4.0
2	江斌	郧阳医学院附属太和医院普通外科	29	85	5.0	8.0
3	曾少波	郧阳医学院附属太和医院普通外科	21	49	3.0	6.0
4	菅志远	郧阳医学院附属太和医院普通外科	24	72	4.0	7.0
5	刘炯	郧阳医学院附属太和医院普通外科	3	4	1.0	2.0
6	严斌	郧阳医学院附属太和医院普通外科	9	22	2.0	4.0