鸭瘟病毒VP 26基因克隆和分子特性分析

• 作者: 招丽婵 朱德康 汪铭书 程安春 罗启慧 蔡铭升 陈孝跃
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭瘟病毒 VP26基因 克隆 分子特性
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1112-1119
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.1
• 字数: 5861字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2009.07.024

摘要

利用作者实验室已构建的DPV CHv株基因文库重组质粒的DNA测序信息,结合NCBI的ORF Finder和BLAST工具分析得到了编码该病毒VP26蛋白基因(UL35)的ORF,然后采用PCR扩增出了VP26基因并将其克隆到pMDl8-T载体上,经PCR和酶切鉴定以及进一步的核酸斑点杂交试验证实该基因即为DPV的VP26基因.分子特性分析表明:该基因大小为354 bp,编码117 aa,包含1个保守结构域,为Herpes_UL35,与小衣壳蛋白家族相关并在Herpes_UL35基因编码蛋白之间高度保守,而且DPV VP26蛋白与GenBank上多种a疱疹病毒同源蛋白的核酸和氨基酸序列具有较高的同源性.系统进化树分析表明,DPV在分类地位上归属于Alphaherpesvirus亚科,而且有可能属于新的属.另外,亚细胞定位分析表明,VP26主要定位于细胞核中.密码子偏爱性分析结果显示,编码VP26相同氨基酸的不同密码子使用频率有较大的差异,DPV VP26与大肠杆菌、酵母和人的密码子使用偏爱性差异分别有18、19和25个.上述研究结果为进一步研究DPV VP26蛋白的功能和作用机理提供分子生物学依据.