新型抗菌肽Perinerin在大肠杆菌中的融合表达

• 作者: 周庆峰 奚涛 李成伟 李明月
• 来源期刊: 生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: perinerin 融合蛋白 诱导表达 优化
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 35-38
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3291字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-9632.2009.02.035

摘要

为了获得新型抗菌肽 perinerin在大肠杆菌中的高效和可溶表达,实验首先采用SOE 法(重叠 PCR 法)获得的 perinerin 基因序列,对目的基因密码子优化,然后将其连接到 pET32a 载体中获得重组表达载体 pET32a-PEN,通过改变诱导时间和温度、诱导剂 IPTG 浓度以及诱变工程菌株等条件和方法,观察重组蛋白的表达效果,并运用金属螯合层析对融合蛋白进行纯化.SDS-PAGE 显示重组菌诱导后表达的融合蛋白分子量约为 26kD,采用变异重组菌株 MUT 3诱导表达,在 2×YT 培养基培养条件下,30 ℃诱导4 h 可获得高效表达的 perinerin 融合蛋白,其表达量约占菌体总蛋白的 50 % 左右,重组蛋白主要以可溶性表达形式存在,可溶性产物最高可达重组蛋白总表达量的 60 %.融合蛋白运用金属螯合层析一步纯化,纯度可达 90 % 以上.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	奚涛	中国药科大学生命科学学院	138	927	15.0	25.0
2	李成伟		26	186	7.0	13.0
3	周庆峰		37	106	6.0	9.0
4	李明月	中国药科大学生命科学学院	12	106	6.0	10.0