小鼠生长激素促分泌素受体真核表达载体的构建及表达鉴定

• 作者: 王志刚 王维刚 费俭 费照亮 邱文才 郑起
• 来源期刊: 中国普通外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 生长激素促分泌素受体 真核表达 拼接PCR
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 473-476
• 页数: 4页
• 分类号: R34-33
• 语种: 中文

摘要

目的 构建小鼠生长激素促分泌素受体(GHS-R)真核表达系统,并观察其在瞬时转染的COS-7细胞系中的表达情况.方法 以小鼠基因组为模板,通过拼接PCR技术(SOE-PCR)克隆出GHS-R的编码序列(CDS),插入真核表达载体pcDNA3中,构建重组真核表达质粒pcDNA3-GHS-R,酶切鉴定并测序,瞬时转染COS-7细胞,用Western Blot鉴定该质粒是否能在真核细胞中表达相应的目的 蛋白.结果 成功扩增了小鼠GHS-R编码序列(CDS),酶切和测序证明pcDNA3-GHS-R构建正确,Western Blot方法证实转染的该质粒能在COS-7细胞中正确表达目的 蛋白.结论 成功构建了小鼠GHS-R真核表达载体,并正确表达蛋白,为进一步研究GHS-R的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑起	上海交通大学医学院附属第六人民医院普通外科	165	920	14.0	20.0
2	王志刚	上海交通大学医学院附属第六人民医院普通外科	94	602	13.0	21.0
3	费俭		26	107	6.0	9.0
4	邱文才	上海交通大学医学院附属第六人民医院普通外科	14	44	5.0	6.0
5	王维刚	上海交通大学医学院附属第六人民医院普通外科	9	34	3.0	5.0
6	费照亮		2	2	1.0	1.0