优化阳离子脂质体介导的组织因子小干扰RNA转染HEK-293的转染条件

• 作者: 张园 易绍东 李志樑 董凤英 邱健
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 组织因子 阳离子脂质体 小干扰RNA 转染
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 176-179
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 字数: 3109字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-930X.2009.02.004

摘要

目的:优化lipofectamineTM2000介导的组织因子(TF)小干扰RNA(siRNA)的转染条件.方法:化学合成法合成特异的TF siRNA,利用绿色荧光蛋白(GFP)进行标记,分别将1.0 μL和1.5 μL的lipofectamineTM2000与含有20、30、40、50、60 pmol的TF siRNA混合液制备成相应的转染混合物,转染人胚胎肾细胞株(HKE-293)24 h后,在荧光显微镜下计数阳性细胞率.同时,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测每组细胞活性.结果:转染效率和细胞活性与lipofectamineTM2000以及siRNA有明显的交互作用,在1.0 μL的lipofectamineTM2000和50 pmol siRNA转染HEK-293细胞时,细胞转染效率最高,转染效率达(86.5±2.4)%,在1.5μL的lipofectamineTM2000转染40 pmol siRNA时,细胞活性为(86.0±7.8)%.结论:经优化转染条件后的lipofectamine TM 2000可高效的将化学合成的siRNA转染入HKE-293细胞株,且细胞活性达85%以上,为建立稳定的沉默转染体系提供实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	易绍东	广州军区广州总医院心血管内科	32	408	9.0	19.0
2	邱健	广州军区广州总医院心血管内科	141	948	15.0	22.0
3	李志樑	南方医科大学附属珠江医院心血管内科	102	526	12.0	16.0
4	董凤英	广州军区广州总医院心血管内科	31	192	7.0	12.0
5	张园	南方医科大学附属珠江医院心血管内科	16	95	6.0	9.0