禽呼肠孤病毒σC基因的克隆和表达

• 作者: 凌珊珊 文心田 曹三杰 王存伟 陈元坤 黄小波
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 禽呼肠孤病毒 σC基因 pMD19T-σC pET32a-σC
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 836-840
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.4
• 字数: 4139字
• 语种: 中文

摘要

采用RT-PCR技术设计扩增禽呼肠孤病毒(ARV)S1133毒株的σC基因,将扩增基因克隆至pMD-19T载体上,经PCR、酶切及测序鉴定,克隆的基因片段为ARV σC基因.将该基因重组至pET32a(+)原核表达载体上成功构建了表达裁体pET32a-σC.该重组质粒在大肠杆菌BL21中经1.0 mmol/L IPTG诱导5 h得到最佳表达.表达重组蛋白的相对分子质量为54 000,以包涵体形式存在.经Western-blot分析表明,该重组蛋白能于ARV阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的反应原性.