猪链球菌2型次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)重组蛋白的酶活性和免疫原性检测

• 作者: 何孔旺 俞正玉 倪艳秀 吕立新 周俊明 张雪寒
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪链球菌 次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH) 克隆 酶活性
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 943-947
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 3734字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2009.06.001

摘要

通过PCR方法从猪链球菌2型(Streptococcus suis)05ZYH33分离株基因组中扩增出次黄嘌呤核苷酸脱氢酶基因(inosine 5-monophosphate dehydrogenase,impdh),长度1 064 bp.PCR产物和pET28a载体分别经过EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切,连接,成功地构建了重组表达质粒pET28a-impah,并转入大肠杆菌(Escherichia coli) BL21(DE3)中,经过1 mmol/L IPTG诱导获得表达,蛋白大小35kD.表达蛋白具有良好的抗原性和酶活性.蛋白经过亲和层析纯化后,在37℃,pH7.0～9.0表现出较强酶活性,NADH A_(340)介于0.662～0.816之间.