糖尿病病人突变CD59蛋白在真核细胞中的表达

• 作者: 吴宁 高美华
• 来源期刊: 青岛大学医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 抗原,CD59 糖尿病 突变 CHO细胞 转染 抗补体活性
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 421-423
• 页数: 3页
• 分类号: R34-33
• 字数: 2496字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4488.2009.05.006

摘要

目的 构建两种含有人CD59蛋白突变体的真核表达载体,获得中国仓鼠卵巢(CHO)细胞真核表达系统,为在基因水平阐明糖尿病血管增殖性病变的发病机制奠定基础.方法 将两种含有不同突变体的人CD59全长cDNA序列重组pALTER质粒,应用阳离子脂质体导入法与pcDNA共转染CHO细胞,用G418筛选阳性克隆,应用细胞免疫组化及流式细胞仪检测CD59在CHO细胞表面的表达. 结果 含有人CD59两种突变体的重组pLATER质粒经酶切和琼脂糖凝胶电泳鉴定,得到长496 bp的电泳条带,与所插入片段完全相符.运用阳离子脂质体导入法将重组pALTER质粒共转染CHO细胞成功,筛选出的阳性克隆经细胞免疫组化检测,证明突变的CD59可在CHO细胞表面表达,流式细胞仪测定表达率分别为68.6%、71.7%.结论 成功建立了两种高效表达人CD59突变体的真核表达系统,能够进一步研究人CD59的突变体糖基化及抗补体活性,为阐明糖尿病血管增殖性病变的发病机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高美华	青岛大学医学院免疫学教研室	181	728	12.0	19.0
2	吴宁	青岛大学医学院附属青岛市市立医院内分泌科	7	1	1.0	1.0