口蹄疫病毒非结构蛋白3B单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 付元芳 刘在新 卢曾军 曹轶梅 李永亮 杨苏珍 田美娜
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 非结构蛋白 3B蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 296-300
• 页数: 5页
• 分类号: S852.4+3
• 字数: 3717字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2009.02.014

摘要

用E.coli原核表达并纯化的口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus, FMDV)非结构蛋白3B免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,间接ELISA筛选出分泌鼠IgG的杂交瘤细胞株,将该杂交瘤细胞注射小鼠产生的腹水,用间接ELISA法筛选获得6株能稳定分泌抗3B蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3E5、4B1、4D7、4E11、7B2、8B11.鉴定结果显示,4B1和4E11细胞分泌IgG1,其余4株细胞分泌IgG2b;纯化后6株腹水单抗的纯度达90%以上,对3B蛋白的ELISA滴度均可达到1:100 000以上;6株单抗均不与FMDV结构蛋白VP1和3D非结构蛋白发生反应;间接免疫荧光试验证明所制备的单抗能够识别3B蛋白;杂交瘤细胞株连续培养3个月以及冻存6个月后复苏,细胞生长良好,杂交瘤细胞分泌的抗体效价稳定.