采用荧光定量PCR溶解曲线法监测人TCR alpha链CDR3谱系漂移技术的初步探讨

• 作者: 姚新生 孙万邦 孙永苹 朱红倩 汤贤英 田祖国 马锐
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: T淋巴细胞受体 互补决定区3 荧光定量PCR 溶解曲线
• 年，卷（期）: 2009,（8）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 727-730
• 页数: 4页
• 分类号: R392.12
• 字数: 3474字
• 语种: 中文

摘要

目的:初步探讨荧光定量PCR溶解曲线分析技术监测人外周血T细胞TCR alpha链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生).方法:提取4例正常人、2例淋巴瘤型白血病患者PBMC中的总RNA,逆转录成cDNA,以32个人TCR alpha 链胚系可变区基因家族 (TRAV)设计上游引物,共同的TCR alpha 胚系链恒定区基因家族(TRAC)设计下游引物,荧光定量PCR(FQ-PCR)扩增32个TRAV基因各家族CDR3谱系,溶解曲线法分析各家族CDR3谱系的单/寡/多克隆增生.结果:正常人外周血T细胞TCR alpha链32个家族CDR3表达频率不一致,各家族PCR产物的溶解曲线谱型图(melting curve spectratyping)呈现熔点不同的CDR3多态性,为多克隆增生的高斯分布,2例淋巴瘤型白血病患者外周血T细胞TCR alpha链32个家族CDR3表达频率不一致,部分家族呈缺失状态,患者各家族PCR产物的溶解曲线谱型图上,多数家族为多克隆增生的高斯分布,但每个患者均出现数量不等的单克隆和寡克隆增生家族.结论:荧光定量PCR溶解曲线分析TCR alpha链CDR3谱系漂移技术方法稳定简便,能较好地监测正常人和临床样本外周血T细胞TCR alpha链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙万邦	遵义医学院免疫学教研室	102	518	12.0	17.0
2	马锐	遵义医学院免疫学教研室	20	62	5.0	7.0
3	姚新生	遵义医学院免疫学教研室	76	410	12.0	17.0
4	朱红倩	贵州省人民医院血液内科	24	86	5.0	8.0
5	田祖国	遵义医学院附属医院血液内科	15	45	4.0	6.0
6	汤贤英	遵义医学院免疫学教研室	19	52	4.0	6.0
7	孙永苹	遵义医学院免疫学教研室	7	39	3.0	6.0