实时荧光定量PCR检测伪狂犬病病毒方法的建立与初步应用

• 作者: 吕晓丽 崔保安 文英会 赵丽 郑兰兰 陈红英 魏战勇
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 伪狂犬病病毒 荧光定量PCR 检测
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 433-436
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3686字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中猪伪狂犬病病毒(PRV)gE基因的序列(EF552427),利用Premier express设计并合成1对引物和相应的TaqMan探针,从猪伪狂犬病病毒(PRV)感染的细胞中提取DNA,进行PCR扩增.将鉴定正确的gE基因片段克隆入pGEM-T Easy载体中,转化大肠杆菌JM109,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒.以该阳性重组质粒为荧光定量PCR标准品模板建立标准曲线.对探针浓度、引物浓度、镁离子浓度和退火温度进行优化,建立了最佳的荧光定量PCR反应体系和扩增程序.经临床应用表明,该荧光定量PCR方法的建立为猪伪狂犬病病毒的早期诊断并定量分析猪伪狂犬病病毒感染程度奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈红英	河南农业大学牧医工程学院	168	646	12.0	16.0
2	崔保安	河南农业大学牧医工程学院	274	2313	25.0	33.0
3	赵丽	河南农业大学牧医工程学院	21	105	7.0	9.0
5	郑兰兰	河南农业大学牧医工程学院	17	27	4.0	5.0
6	魏战勇	河南农业大学牧医工程学院	71	500	12.0	18.0
7	文英会	西南民族大学生命科学与技术学院	3	11	1.0	3.0
8	吕晓丽	河南农业大学牧医工程学院	6	56	4.0	6.0