16S rDNA快速鉴定血液制品中污染细菌的测序方法的建立

• 作者: 严力行 吕杭军 应燕玲 朱发明 许先国
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 血液细菌污染 16S rDNA 多聚酶链反应.测序方法
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 880-883
• 页数: 4页
• 字数: 3693字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2009.10.003

摘要

目的 建立基于16S rDNA快速鉴定细菌的PeR测序方法(PCR-SBT).方法 通过一组16S rDNA通用引物扩增得到基因组全长,PCR产物经纯化后直接测序分析.利用BLAST软件从GenBank数据库中搜索相关菌株的16S rDNA全序列,采用Clustal X软件进行多序列比对和同源性分析,确定细菌的种属,并与常规生化鉴定结果比较.利用大肠杆菌基因组一系列稀释度标本进行PeR扩增,检测方法的敏感性.结果 实验利用多对引物建立了16S rDNA全长序列分析方法,13个标准菌株通过PCR-SBT方法获得约1400 bp的全长序列.比对分析13个标准菌株测序结果与预期标准序列完全一致,证实建立的PCR-SBT方法结果可靠.利用建立的PCR-SBT法,对实验室从血小板制品和脐带血中分离得到不同未知菌株进行鉴定,成功确定了这些菌株的种属.以大肠杆菌DNA为模板,方法的最低检测限为反应体系DNA含量0.2 ng.结论 建立的基于16S rDNA的PCR-SBT方法是可行的,可快速准确地检测及鉴定细菌种类,尽早发现细菌污染血制品,对污染血制品输注后的针对性治疗方面具有潜在的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	应燕玲	浙江省血液中心输血研究所卫生部血液安全研究重点实验室	8	34	3.0	5.0
2	朱发明	浙江省血液中心输血研究所卫生部血液安全研究重点实验室	108	522	13.0	18.0
3	吕杭军	浙江省血液中心输血研究所卫生部血液安全研究重点实验室	69	342	11.0	14.0
4	严力行	浙江省血液中心输血研究所卫生部血液安全研究重点实验室	91	548	14.0	18.0
5	许先国	浙江省血液中心输血研究所卫生部血液安全研究重点实验室	52	370	13.0	17.0