利用GATEWAYTM技术快速构建番木瓜环斑病毒HC-pro基因的RNAi表达载体

• 作者: 翟金玲 高艳梅 黄惜
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番木瓜环斑病毒 GATEWAYTM术 RNAi HC-pro基因
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 生物技术应用
• 页码范围: 505-509
• 页数: 5页
• 分类号: S436.67:Q78
• 字数: 3335字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2009.04.019

摘要

通过RT-PCR扩增番木瓜环斑PRsV病毒HC-pro基因,序列比对结果表明,克隆到的该基因片段与已知的海南或华南地区已克隆的HC-pro基因只有约92%的同源性,说明PRSV病毒具有较大的变异性.为了培育番木瓜转基因抗病植株,利用pWATERGATEI体和GATEWYTM技术,成功构建了番木瓜环斑病毒HC-pro基因的RNAi表达载体.具体步骤如下:①设计带特异性重组序列attB的HC-pro基因PCR的引物;②利用该引物进行RT-PCR扩增日C-pro基因;③通过BP反应,将扩增得到的HC-pro基因序列插入入门载体pDONR201中;④通过LR反应将HC-prd基因序列从pDONR201重组到目标载体pWATERGATE中,得到PRSV HC-pro基因的RNAi表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄惜	海南大学生物科学技术研究所	17	50	4.0	6.0
2	高艳梅	海南大学生物科学技术研究所	5	19	2.0	4.0
3	翟金玲	海南大学生物科学技术研究所	6	27	3.0	5.0