GatewayTM 系统快速构建番木瓜环斑病毒CP基因反向重复序列表达载体

• 作者: 伏卉 姜玲 秦长平
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番木瓜环斑病毒 反向重复序列 重组 Gateway TM
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 526-529
• 页数: 4页
• 分类号: S188
• 字数: 2530字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2008.03.028

摘要

设计含有attB侧翼序列的引物,用于番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus)的外壳蛋白基因(CP)基因的PCR扩增.在BP重组酶的作用下,将CP基因与受体载体pDONRTM221发生重组反应,产生入门克隆.在LR重组酶作用下,将入门克隆与目的载体pHellsgate12发生重组反应,再进行平板培养筛选及PCR扩增和酶切反应.结果证明,用限制性内切酶Xho I酶切消化后,琼脂糖凝胶电泳获得了预期长度为1700 bp的重组片段;以启动子和外壳蛋白基因及外壳蛋白基因和终止子序列为基础,分别设计2对引物,经PCR扩增分别获得582和773 bp片段.结果表明,获得了含有内含子的CP基因反向重复结构的表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦长平	华中农业大学园艺林学学院国家果树脱毒种质资源室内保存中心教育部园艺植物生物学重点实验室	15	92	7.0	8.0
2	姜玲	华中农业大学园艺林学学院国家果树脱毒种质资源室内保存中心教育部园艺植物生物学重点实验室	12	160	7.0	12.0
3	伏卉	华中农业大学园艺林学学院国家果树脱毒种质资源室内保存中心教育部园艺植物生物学重点实验室	1	9	1.0	1.0