慢病毒携带shRNA抑制CR-1基因表达对CNE-2细胞特性的影响

• 作者: 吴正蓉 吴立蓉 姚开泰
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 慢病毒 CR-1 鼻咽癌
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 671-676
• 页数: 6页
• 分类号: R739.6
• 字数: 5116字
• 语种: 中文

摘要

[目的]应用慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)技术,有效沉默鼻咽癌细胞CNE-2的CR-1基因表达,研究CR-1对鼻咽癌细胞生物学行为的影响. [方法]构建针对CR-1的siRNA慢病毒表达载体[含H1启动子和绿色荧光蛋白(GFP)].利用包装细胞293FT生产慢病毒,感染鼻咽癌细胞CNE-2,流式筛选GFP阳性细胞.应用荧光定量PCR、Westernblot检测病毒感染后CNE-2细胞中CR-1基因的mRNA和蛋白表达,获得干扰CR-1基因的细胞群.并用MTT法、平板克隆形成实验及Boyden侵袭小室观察CR-1干扰后对CNE-2细胞生物学行为的影响.[结果]PCR和测序证实,成功构建了CR-1 shRNA的慢病毒载体pLVTHM-shCR-1.荧光定量PCR和Western blot结果表明,所获得的细胞中CR-1 mRNA及蛋白表达水平较阴性对照组、空白对照组均显著降低(p<0.05).CR-1干扰后的细胞生长明显减慢,克隆形成能力减弱,侵袭运动能力下降.[结论]通过RNAi技术阻断CR-1的表达,可抑制CNE-2细胞的生长、增殖、迁徙,提示CR-1在鼻咽癌的发生、发展过程中起重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚开泰	南方医科大学基础医学院肿瘤研究所	65	406	11.0	16.0
2	吴立蓉	南方医科大学广州中医药大学中药学院	1	3	1.0	1.0