携带自分泌运动因子基因的慢病毒载体转染大鼠成肌细胞

• 作者: 李任 牙祖蒙 田怡 金岚
• 来源期刊: 中华创伤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 成肌细胞 自分泌运动因子 转染 免疫缺陷病毒,猫
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 653-657
• 页数: 5页
• 分类号: R6
• 字数: 3982字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-8050.2009.07.211

摘要

目的 探索高效、安全的自分泌运动因子(autocrine motility factor,AMF)基因转染方法 ,为携带AMF基因的成肌细胞移植提供实验依据. 方法 取SD大鼠胸肌,用组织块培养法原代培养成肌细胞,纯化、鉴定、扩增成肌细胞;构建携带AMF及增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreen fluorescent protein,EGFP)基因的猫免疫缺陷病毒(feline immuneddieiency vires,FIV)慢病毒载体;后者转染至成肌细胞;用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜检测EGFP以确定转染的阳性率;应用免疫组化方法 检测AMF的表达. 结果 经过2周的原代培养及纯化,可获得纯度为98%的成肌细胞,在转染复数(multiplieity ofinfection,MOI)为100时,可获得90.4%(P<0.01)的转染阳性率,而转染后的AMF基因能正常表达. 结论 组织块培养法适合成肌细胞的原代培养;FIV载体能以高转染率将AMF基因转至大鼠成肌细胞,并获得高效的表达.该方法 为一种较理想的AMF基因转染模式.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田怡	重庆医科大学附属第二医院整形美容科	16	53	3.0	7.0
2	牙祖蒙	重庆医科大学附属第二医院整形美容科	20	106	5.0	9.0
3	金岚	重庆医科大学附属第二医院整形美容科	31	76	5.0	7.0
4	李任	重庆医科大学附属第二医院整形美容科	14	59	5.0	7.0