慢病毒介导RNA干扰血管内皮生长因子基因增强K562细胞对STI571敏感性

• 作者: 岑建农 张日 朱子玲 李丽
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血管内皮生长因子 RNA干扰 慢病毒载体 STI571 K562细胞
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1122-1126
• 页数: 5页
• 分类号: R733.7
• 字数: 3756字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2009.06.015

摘要

目的:探讨慢病毒载体介导RNA干扰(RNAi)抑制血管内皮生长因子(VEGF)基因表达对白血病细胞系K562增殖和凋亡的影响. 方法:构建靶向VEGF基因的短发夹状RNA(shRNA)慢病毒载体,与慢病毒包装质粒通过脂质体转染至293T细胞,包装产生的病毒液感染K562细胞.采用实时荧光定量PCR、Western blotting、ELISA等方法检测RNAi对K562细胞VEGF mRNA和蛋白表达的影响;台盼蓝拒染法和MTT法分析转导VEGF-shRNA对K562细胞增殖的影响;流式细胞术检测经STI571(甲磺酸伊马替尼)作用后细胞凋亡变化情况. 结果:构建VEGF基因shRNA慢病毒载体(pRNAT-shRNA),并成功将其导入K562细胞.与K562和K562-con(转导空载体)组细胞相比,转导pRNAT-shRNA的K562-shVEGF细胞VEGF mRNA和蛋白表达均显著下降;生长曲线提示K562-shVEGF细胞增殖速度减慢;在STI571作用下,K562-shVEGF细胞凋亡率较K562和K562 -con组细胞明显增高(P<0 05).结论:慢病毒载体介导的VEGF基因RNA干扰可有效抑制K562细胞增殖,并能够增强细胞对STI571的敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张日		5	7	2.0	2.0
2	岑建农		3	11	2.0	3.0
3	朱子玲		2	3	1.0	1.0