鲁西黄牛α干扰素基因的原核表达及其抗血清的制备

• 作者: 张永红 李景鹏 王长法
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 黄牛 α干扰素基因 表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 41-45
• 页数: 5页
• 分类号: S858.23|S852.4
• 字数: 3177字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2009.05.010

摘要

采用PCR方法从鲁西黄牛基因组DNA中克隆了α干扰素(BoIFN-α)基因,并插入到pET32a+中,构建成重组原核表达质粒pET32a+/BoIFN-α,进行测序和诱导表达.测序结果表明,鲁西黄牛IFN-α基因全长498 个核苷酸,含1个开放阅读框(ORF),编码166 个氨基酸的成熟蛋白,与已报道的牛α干扰素C亚型氨基酸组成同源性为97.6%.表达产物经SDS-PAGE分析,表达出40 ku的融合蛋白,表达量占菌体总蛋白的26.7%.表达产物经镍离子螯合次氨基三乙酸(Ni-NTA)亲和层析纯化,纯化产物进行复性后免疫昆明系小鼠2次,制备高滴度的牛IFN-α抗血清.结果从鲁西黄牛中克隆了IFN-α基因的一种新亚型,即BoIFN-α C2,实现了高效表达和纯化,并制备了鼠抗牛IFN-α,为重组牛干扰素的开发奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张永红		2	2	1.0	1.0
2	王长法		1	1	1.0	1.0
3	李景鹏		1	1	1.0	1.0