带新霉素抗性的萤光素酶报告载体的构建

• 作者: 何婷玉 冯龙 卫艳萍 李月白 董子明 赵国强 马云云
• 来源期刊: 郑州大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 萤光素酶报告载体pGL3 新霉素抗性基因neo 克隆
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 533-536
• 页数: 4页
• 分类号: R965.1
• 字数: 2546字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2009.03.025

摘要

目的:构建带新霉素抗性的萤光素酶报告载体.方法:设计扩增新霉素抗性基闪neo,克隆人萤光素酶报告载体pGL3,得到pGL3-neo.分别比较pGL3、pGL3-CMV promoter瞬时转染组和经G418筛选的pGL3-neo、pGL3-neo-CMV promoter稳定转染组细胞萤光素酶活性.结果:PCR扩增出neo表达单元;酶切和DNA测序分析鉴定得到带新霉素抗性的萤光索酶报告质粒pGL3-neo.G418筛选可获得稳定转染pGL3-neO)细胞株和稳定转染pGL3-neo-CMV promoter的细胞株.荧光检测显示:瞬时转染pGL3组、pGL3-CMV promoter组及稳定转染pGL3-neo组、pGL3-neo-CMV promoter组萤光素酶活性值分别为1 047±86、1 504±107和34 819±l 479、456 109 4±15 791,稳定转染组萤光素酶活性均高于瞬时转染组,P<0.05.结论:成功构建了带新霉素抗性的萤光素酶报告基因载体,使报告基因检测数据的敏感性和可靠性显著提高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何婷玉	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	3	11	2.0	3.0
2	冯龙	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	13	30	3.0	4.0
3	马云云	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	8	24	2.0	4.0
4	赵国强	郑州大学基础医学院	245	807	11.0	16.0
5	李月白	郑州大学基础医学院生物化学教研室	65	476	12.0	17.0
6	董子明	郑州大学基础医学院病理生理学教研室	237	965	14.0	19.0
7	卫艳萍	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	7	4	1.0	1.0