植物病毒表达载体pClYVV/CP/W的构建及GFP表达的研究

• 作者: 刘芳普 孟鹏 张敏 王振东 王晓华 秦会权 薛立江 郑新伟
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 植物病毒表达载体 pC1YVV/CP/W pC1YVV/CP/W/GFP 构建 表达
• 年，卷（期）: 2009,（28）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 13510-13513
• 页数: 4页
• 分类号: S188
• 字数: 3602字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2009.28.031

摘要

[目的]研究植物病毒表达载体pC1YVV/CP/W的构建及用pC1YVV/CP/W表达绿色荧光蛋白(GFP),为植物反应器生产有用蛋白、开发有效的植物病毒载体提供参考.[方法]用三叶草黄脉病毒侵染性全长cDNA克隆pC1YVV基因组的Nib/CP基因之间的一段多克隆位点和两侧含有病毒蛋白酶Nia切割识别序列的多聚脱氧核糖核苷酸接头,构建pC1YVV/CP/W载体,并将绿色荧光蛋白基因插入pC1YVV/CP/W中构建pC1YVV/CP/W/GFP载体,用反转录PCR对重组病毒克隆转录情况进行检测,并用Western杂交对重组病毒克隆表达的目的基因产物进行测定.[结果]pC1YVV/CP/W/GFP接种的蚕豆幼苗表现出与野生型C1YVV相同的症状,发病率达100%,表明重组病毒克隆pC1YVV/CP/W/GFP有侵染性,外源基因的插入没有破坏载体pC1YVV/CP/W的开放阅读框;外源基因在F4子代病毒基因组中稳定存在;重组病毒克隆pC1YVV/CP/W/GFP至少到F4子代病毒能稳定表达GFP.[结论]该研究结果为用植物表达有用蛋白提供了有用的植物病毒载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王振东	沈阳农业大学生物科学技术学院	39	231	9.0	13.0
2	郑新伟		4	19	2.0	4.0
3	孟鹏	沈阳农业大学生物科学技术学院	6	32	3.0	5.0
4	王晓华	沈阳农业大学生物科学技术学院	5	12	2.0	3.0
5	秦会权		2	2	1.0	1.0
6	刘芳普		2	2	1.0	1.0
7	薛立江		2	2	1.0	1.0
8	张敏		3	2	1.0	1.0