定点突变重组ING4腺病毒基因转染系统的载体构建及鉴定

• 作者: 刘德生 徐海洋 王红兵 耿俊颖
• 来源期刊: 中国现代医生
• 学科: 医学
• 关键词: ING4基因 点突变 腺病毒 载体 基因治疗
• 年，卷（期）: 2009,（32）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 18-20
• 页数: 3页
• 分类号: R34
• 字数: 2289字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-9701.2009.32.008

摘要

目的 重组构建hING4(人ING4)氨基酸序列.方法 运用定点突变技术,在鼠ING4的基础上,设计两对突变引物P1、P2和P3、P4及全长ING4上下游引物P5、P6,通过四轮PCR,将mlNG4基因序列进行人源化改造,获得了编码hING4氨基酸的基因序列.将获得酶切目的 基因片段,连接到转移载体pAdTrack-CMV上,形成重组转移载体pAdTrack -CMV-ING4.重组转移载体经Pmel酶切后与pAdEasy-1腺病毒载体在BJ5183大肠杆菌中同源重组,得到重组腺病毒载体pAdeasy-1-pAdTraek-CMV-ING4,经Pacl酶切后脂质体转染QBI-293A包装细胞,获得重组腺病毒Ad-ING4.结果 测序和RT-PCR结果表明hING4基因构建成功.结论 hING4基因重组腺病毒载体构建成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	耿俊颖	徐州医学院附属医院肿瘤科	5	11	2.0	3.0
2	王红兵	徐州医学院附属医院肿瘤科	26	91	6.0	8.0
3	刘德生	徐州医学院附属医院肿瘤科	12	43	4.0	6.0
4	徐海洋	徐州医学院附属医院肿瘤科	6	18	3.0	4.0