鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株HLJ-0504 VP5基因缺失株感染性克隆的构建及鉴定

• 作者: 李凯 王永强 王笑梅 祁小乐 秦立廷 高宏雷 高玉龙 高立
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 传染性法氏囊病病毒超强毒株 VP5 感染性克隆 重组病毒
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1-7
• 分类号: S858.312.659.6|Q78
• 字数: 4080字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2010.02.001

摘要

利用体外定点突变技术,缺失vvIBDV HLJ-0504株VP5基因,通过多重PCR在基因组两端分别引入锤头状核酶序列(HamRz)和丁肝病毒核酶序列(HdvRz).将带有核酶序列的IBDV基因组插入裁体pCAGGs的β肌动蛋白启动子下游,构建了IBDV感染性克隆pCAG-GHIJ0504A ΔVPSHRT,将该感染性克隆与pCAGGHLJ0504BHRT共转染DF-Ⅰ细胞.IFA,RT-PCR,电镜观察均显示获得重组病毒,将其命名为rHIJ0504HT△VP5.vvIBDV VP5基因缺失感染性克隆的成功构建为我们利用反向遗传操作技术快速致弱vvIBDV,构建IBD的候选疫苗株奠定了基础.