小麦蓝矮植原体免疫膜蛋白(Imp)的跨膜区影响其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 于祥泉 吴云锋 孙润红 张银武 李艳 杨洋 陶烨
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小麦蓝矮植原表体 免疫膜蛋白 跨膜区
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
• 页码范围: 587-592
• 分类号: S432.4
• 字数: 3177字
• 语种: 中文

摘要

根据跨膜区预测结果,设计ImpF1/ImpR1和ImpP2/ImpR2两对特异性引物.以ImpF1/ImpR1,ImpF1/ImpR2,Imp-F2/ImpR1和ImpF2/ImpR2共4个组合经PCR扩增得到4个目标片段,即:免疫膜蛋白Imp基因的全长(Imp-B);切除C-端跨膜区的Imp基因的基因序列(Imp-N);切除N-端跨膜区的Imp基因的基因序列(Imp-C);切除N-和C-端跨膜区的Imp基因的基因序列(Imp-S).经酶切连接到原核表达载体Pmal-c2x,并转入E.coli BL21(DE3)PlysS菌株中.SDS-PAGE电泳验证,只有切除N-、C-端跨膜区的Imp基因的基因序列(Imp-S)得到大量表达,结果表明:小麦蓝矮植原体免疫膜蛋白的跨膜区影响其在大肠杆菌中的表达.