乙型肝炎病毒核心启动子下游克隆入Teto序列后其在不同细胞系中转录活性的变化

• 作者: 刘忠湘 姜河 宫卫东 易军 王岭 赵亚 雷俊川
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 四环素调控系统 核心启动子 乙型肝炎病毒 肝细胞特异性 萤光素酶
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 771-774
• 分类号: Q78|R392.12
• 字数: 2993字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.06.005

摘要

目的:探讨将Teto序列克隆入乙型肝炎病毒核心启动子(Cp)下游后对该启动子在不同细胞系中转录活性的影响.方法:利用PCR从质粒pTL-8中扩增7个Teto序列,并将其克隆入T载体pMD19-T/Simple中,测序正确后将7个Teto序列亚克隆入pGL3-Basic/Cp萤光素酶报告基因质粒中Cp启动子的下游,以构建质粒pGL3-Basic/Cp/x7t.将能表达TetR的质粒pTL-8的萤光素酶编码基因切除后,与pGL3-Basic/Cp/x7t共转染肝癌细胞系HepG2、宫颈癌细胞系HeLa、绿猴肾细胞系COS-7、乳腺癌细胞系MDA-MB-231和结肠癌细胞系HT-29,通过双萤光素酶检测系统检测萤光素酶在这些不同细胞系中的活性,以分析将Teto序列克隆入乙型肝炎病毒核心启动子下游后对Cp在不同细胞系中转录活性的影响.结果:构建了质粒pGL3-Basic/Cp/x7t,将其转染HeLa、COS-7、HepG2、MDA-MB-231和HT-29细胞后其相对萤光素酶活性分别为56.14、171.52、211.03、6.11和34.24.结论:将Teto序列克隆入Cp下游并不能明显提高Cp的转录活性,而且破坏了Cp的组织特异性转录活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	易军	第四军医大学西京医院普通外科	51	157	7.0	9.0
2	雷俊川	第四军医大学基础部微生物学与病原生物学教研室	17	24	2.0	4.0
3	宫卫东	第四军医大学唐都医院介入科	33	128	6.0	9.0
4	赵亚	第四军医大学基础部微生物学与病原生物学教研室	40	90	6.0	8.0
5	姜河	第四军医大学基础部微生物学与病原生物学教研室	4	6	1.0	2.0
6	刘忠湘	第四军医大学基础部微生物学与病原生物学教研室	49	141	5.0	10.0