小鼠白蛋白基因启动子的克隆及其在不同细胞系中转录活性的检测

• 作者: 何星星 刘瑶 常莹 张强 林菊生
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白蛋白类 启动子 肝
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1365-1369
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3345字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2009.07.022

摘要

目的:对比小鼠白蛋白(mouse albumin promoter,ALB)启动子调控下的增强型绿色荧光蛋白(en-hanced green fluorescent protein,EGFP)在不同细胞系中的转录活性.方法:以小鼠全血基因组DNA为模板,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增ALB启动子序列,克隆至pEGFP-1中,构建重组体pALB-EGFP;在Lipofectamine介导下将pALB-EGFP、pEGFP-N1转染人胎肝细胞L02、人宫颈癌细胞HeLa、人结肠癌细胞SW480、人胰腺癌细胞Bxpc-3;荧光显微镜和流式细胞仪对各转染细胞中EGFP的表达进行检测.结果:pALB-EGFP构建成功;L02转染pALB-EGFP 72 h后,ALB启动子可起始EGFP的表达,转录活性为人巨细胞病毒(cytomegalovir-us,CMV)启动子的1/4,其它转染细胞的ALB不能起始EGFP的转录;稳定筛选后,ALB的转录活性达到与CMV相当的水平.结论:构建的重组载体在肝脏来源细胞中具有较高的转录活性,为建立肝脏特异性表达目的基因的转基因小鼠模型奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林菊生	华中科技大学同济医学院附属武汉同济医院肝病研究所	113	535	12.0	17.0
2	张强	华中科技大学同济医学院附属武汉同济医院肝病研究所	118	791	15.0	22.0
3	常莹	华中科技大学同济医学院附属武汉同济医院肝病研究所	26	134	8.0	10.0
4	何星星	华中科技大学同济医学院附属武汉同济医院肝病研究所	13	54	5.0	7.0
5	刘瑶	华中科技大学同济医学院附属武汉同济医院肝病研究所	13	109	5.0	10.0