家蝇半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因MdCPI的克隆、表达及活性检测

• 作者: 唐婷 张瑞英 柳峰松 董晓寅
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 家蝇 半胱氨酸蛋白酶抑制剂 克隆 重组表达 抑制活性
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 611-617
• 分类号: Q966
• 语种: 中文

摘要

半胱氨酸蛋白酶抑制剂是具有抑制半胱氨酸蛋白酶活性的一类蛋白超家族.本研究根据EST序列信息,通过RACE技术克降得到1条家蝇Musca domestica半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因MdCPI,该基凶含有1个357 bp开放阅读框,编码118个氨基酸残基,推导的多肽N端17个氨基酸残基为信号肽序列.同源分析表明,MdCPI氨摹酸序列与红尾肉蝇Sarcophaga crassipalpis的CPI相似性最高(identity=51%).以邻接法(NJ)构建的系统树表明,家蝇与其他双翅同昆虫CPI起源于共同的祖先,属于125A型蛋白家族.为了解家蝇CPI对半胱氨酸蛋白酶的抑制活性,构建pET-17b-MdCPI表达载体,并转入大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)进行重组表达.研究发现1μg重组家蝇CPI能够抑制约14μg木瓜蛋白酶的水解活性.结果表明MdCPI确属CPI家族,可能同其他家族成员具有相似的功能,参与免疫及生理凋控.这些结果为研究MdCPI在家蝇体内作用机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张瑞英	河北大学生命科学学院	28	287	8.0	16.0
2	唐婷	河北大学生命科学学院	20	116	8.0	10.0
3	柳峰松	河北大学生命科学学院	46	280	9.0	14.0
4	董晓寅	河北大学生命科学学院	3	6	2.0	2.0