A型H1N1及H3N2亚型流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 廖明 廖秀云 徐海聂 杨素 沙才华 秦爱建 罗宝正 薄清如 陈伟生 陈博文
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: A型流感病毒 H1N1亚型 H3N2亚型 实时荧光RT-PCR
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 245-251
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.5
• 语种: 中文

摘要

根据A型H1N1亚型流感病毒2009年北美变异株和H3N2亚型流行株的基因序列,设计了3套特异性引物、TaqMan探针,分别用不同的荧光基团标记,以构建的A型流感病毒及H1N1和H3N2亚型流感病毒基因重组质粒作为阳性对照,经反应条件优化,特异性、敏感性和重复性试验,筛选出3套不同的反应体系及同一个反应参数,建立了可同时检测A型流感病毒、H1N1和H3N2亚型流感病毒的实时荧光RT-PCR方法.结果表明,该方法可特异地检测H1N1(人源、猪源)、H3N2(猪源),禽流感病毒H5、H9等A型流感病毒,且与新城疫病毒、减蛋综合征病毒等其他病毒不发生交叉反应,具有特异、敏感、重复性好、快速、费用低廉等优点,试验耗时仅3 h.表明,建立的方法,一次试验即可完成A型流感病毒的初筛和H1N1、H3N2亚型流感病毒的初步确认定型.