H3N2亚型禽流感病毒双重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 刘婷婷 宋德贵 罗思思 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文 黄娇玲 黄莉
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 H3N2亚型 实时荧光定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 28-32
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 3651字
• 语种: 中文

摘要

为建立快速、简便检测H3N2亚型禽流感病毒(AIV)的方法,根据H3和N2亚型AIV HA、NA基因保守序列,分别设计筛选了特异性引物和用不同荧光基团标记的TaqMan探针.通过优化反应条件,建立了H3N2亚型AIV双重实时荧光定量RT-PCR检测方法.结果显示该法特异性强,不与其他亚型AIV和常见禽病病原体发生交叉反应,敏感性达100拷贝/μL;组内组间重复性好,平均变异系数均小于3％;应用该法对96份临床样品检测,结果与病毒分离鉴定结果一致.表明本研究建立的H3N2亚型AIV双重实时荧光定量RT-PCR具有快速、特异、敏感、重复性好等优点,可用于H3N2亚型AIV的快速诊断和监测.