实时荧光定量PCR快速检测百日咳鲍特菌方法学建立及评价

• 作者: 王慧 罗炜 赖克方
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 百日咳鲍特菌 聚合酶链反应 实时荧光定量 IS481基因
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 407-409
• 页数: 3页
• 分类号: R516.6|Q503
• 语种: 中文

摘要

目的 建立实时荧光定量PCR检测百日咳鲍特菌的方法.方法 以百日咳鲍特菌的重复插入序列IS481为目的 基因,设计探针和引物,以克隆的IS481基因片段为DNA模板,在荧光定量PCR仪上建立实时荧光定量PCR检测方法和标准曲线,并进行灵敏度、重复性、特异性实验.结果 建立的定量标准曲线阈值循环数(Ct)与模板拷贝数呈良好线性关系(r=0.998);最低检测浓度为102 copies/μl;批内及批间变异系数均小于4%;对临床其他常见呼吸道病原体不出现特异性扩增曲线.结论 实时荧光定量PCR法检测IS481基因可用于百日咳鲍特菌的快速检测,具有较好的灵敏度、特异性及重复性.