稳定表达siRNA-STAT3基因Hep-2细胞系的建立

• 作者: 孙红村 王俊阁 皮丽宏 高昆
• 来源期刊: 中国耳鼻咽喉头颈外科
• 学科: 医学
• 关键词: 喉肿瘤 癌,鳞状细胞 转录激活因子3 转染 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 399-402
• 分类号: R76
• 字数: 3809字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立稳定表达siRNA-STAT3基因的Hep-2细胞系,为进一步探讨STAT3在喉癌中的作用机制提供基础.方法 产生针对STAT3的小发卡状RNA寡核苷酸,连接到PGPU6/GFP/Neo载体,双酶切和质粒测序鉴定真核表达质粒PGPU6/GFP,Neo-siRNA-STAT3,G418筛选稳定转染细胞系,蛋白印迹法测定P-STAT3的表达.分别用MTT法绘制生长曲线和平板克隆形成实验测定单细胞增殖能力.结果 构建了重组干扰质粒并筛选出了阳性克隆,蛋白印迹法鉴定STAT3被抑制后P-STAT3表达也明显下降.生长曲线显示siRNA-STAT3组3天后抑制效应才较为明显(P=0.001),5 d后抑制效应更加突出(P=0.000),其抑制效应呈时间-效应关系.另外,siRNA-STAT3组单克隆形成率也明显低于对照组(P=0.000).结论 本研究筛选了可稳定、较高水平表达siRNA-STAT3的Hep-2细胞系.干扰STAT3表达对细胞增殖抑制的作用较为明显.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	皮丽宏	河北省人民医院耳鼻咽喉科	21	80	5.0	7.0
2	高昆	河北省人民医院麻醉科	13	56	3.0	7.0
3	孙红村	煤炭总医院耳鼻咽喉科	1	1	1.0	1.0
4	王俊阁	煤炭总医院耳鼻咽喉科	6	36	4.0	6.0