Livin shRNA稳定转染Hep-2细胞系的建立

• 作者: 李创伟 温国封 王双乐 邓文婷
• 来源期刊: 中国耳鼻咽喉头颈外科
• 关键词: 凋亡调节蛋白质类 细胞,培养的 RNA干扰 Livin基因
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 583-586
• 页数: 4页
• 字数: 2981字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建靶向Livin基因干扰真核表达质粒,建立干扰质粒稳定转染的Hep-2细胞系,下调Livin基因在Hep-2细胞系中的表达.方法 针对Livin基因的mRNA序列设计干扰序列,分别构建1个shRNA质粒表达载体和1个阴性对照质粒,大肠杆菌扩增、酶切及测序鉴定,用脂质体介导转染Hep-2细胞,经G418筛选出稳定转染的细胞系,用Real-time PCR和Western blot检测Livin在mRNA和蛋白水平的抑制效果.结果 经测序证实成功构建pGenesil-Livin shRNA真核表达质粒.干扰质粒稳定转染的Hep-2细胞在荧光显微镜下观察,发出绿色荧光.重组质粒转染Hep-2细胞后,Livin基因在mRNA及蛋白水平明显下降,mRNA水平下调47.17％,蛋白水平下调34.25％.结论 成功构建以Livin为靶向的Livin shRNA真核表达质粒.对喉癌Hep-2细胞中Livin的表达具有显著抑制效应,为研究Livin在Hep-2中的功能和喉癌的基因治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邓文婷	中山大学附属汕头医院耳鼻咽喉头颈外科	6	18	2.0	4.0
3	李创伟	中山大学附属汕头医院耳鼻咽喉头颈外科	4	14	2.0	3.0
6	王双乐	中山大学附属汕头医院耳鼻咽喉头颈外科	3	12	2.0	3.0
7	温国封	中山大学附属汕头医院耳鼻咽喉头颈外科	1	1	1.0	1.0