NY-ESO-1抗原T细胞受体基因慢病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 冯丹丹 徐珩 李宁 闾军 顾娜
• 来源期刊: 北京医学
• 学科: 医学
• 关键词: NY-ESO-1T细胞受体 慢病毒载体 Hela细胞
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 951-954
• 分类号: R5
• 字数: 3407字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建NY-ESO-1抗原T细胞受体基因(T Cell Receptor,TCR)的慢病毒载体并获得重组慢病毒.方法 设计特异性NY-ESO-1 TCR的引物,用聚合酶链反应(PCR)对我们前期已克隆的NY-ESO-1 TCR cDNA进行体外扩增,双酶切后定向插入到pCL20c-MSCV-GFP质粒,构建NY-ESO-1抗原特异性TCR基因的重组慢病毒载体pCL20c-MSCV-ESOTCR,并经酶切、PCR及测序鉴定.用pCL20c-MSCV-ESOTCR、pCL20c-HIV-gp、pCAG4-RTR2和CAG-VSV-G共转染T293包装细胞,获得上清,上清浓缩后感染Hela细胞,观察ESOTCR基因及蛋白水平的表达.结果 经PCR及测序证实,成功构建重组慢病毒载体pCL20c-MSCV-ESOTCR,包装产毒后感染Hela细胞,RT-PCR法及荧光显微镜均能检测及观察到基因及蛋白水平的表达.结论 成功构建了表达NY-ESO-1抗原T细胞受体基因(T Cell Receptor,TCR)的重组慢病毒载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李宁	首都医科大学附属北京佑安医院肝病消化科	247	1341	19.0	25.0
2	闾军	首都医科大学附属北京佑安医院肝病消化科	39	131	6.0	9.0
3	顾娜	首都医科大学附属北京佑安医院肝病消化科	8	14	2.0	3.0
4	冯丹丹	首都医科大学附属北京佑安医院肝病消化科	7	8	2.0	2.0
5	徐珩		4	4	1.0	1.0