重组腺病毒载体pAd-NY-ESO-1-EGFP的构建及鉴定

• 作者: 宋军 张又莉 徐少勇 王家宁 王斌 郭凌郧 黄永章
• 来源期刊: 郧阳医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 同源重组 肿瘤特异性抗原 NY-ESO-1 腺病毒 增强型绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 486-488,491
• 页数: 4页
• 分类号: Q784
• 字数: 3141字
• 语种: 中文

摘要

目的:利用细菌内同源重组法构建含人肿瘤特异性抗原的腺病毒质粒.方法:设计NY-ESO-1 cDNA扩增引物,从pETl5b-NY-ESO-1质粒中扩增NY-ESO-1的DNA序列,与pShuttle-IRES-hrGFP-2进行连接,PCR和EcoRV酶切鉴定重组质粒pShuttle-NY-ESO-1-EGFP,经Pme I酶切线性化后,转化含pAdeasy-1的超感受态BJ5183大肠杆菌,细菌内同源重组法构建腺病毒质粒pAd-NY-ESO-1-EGFP;质粒经Pac I酶切鉴定,DNA测序.结果:线性化的pShuttle-NY-ESO-1-EGFP转化含pAdeasy-1的超感受态BJ5183大肠杆菌,重组质粒经酶切获得一大于23 kb的大片段和4.5kb的片段,PCR反应扩增出了340 bp的片段.结论:用细菌内同源重组法成功地构建了含NY-ESO-1的重组腺病毒质粒,为进行表达NY-ESO-1的重组腺病毒的制备及肿瘤特异性抗原NY-ESO-1的核酸疫苗在肿瘤方面的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐少勇	郧阳医学院附属人民医院消化内科	68	210	7.0	11.0
2	王家宁	郧阳医学院附属人民医院临床医学研究所	119	709	13.0	20.0
3	黄永章	郧阳医学院附属人民医院临床医学研究所	66	379	11.0	16.0
4	王斌	郧阳医学院附属人民医院消化内科	47	188	6.0	12.0
5	宋军	郧阳医学院附属人民医院消化内科	9	15	2.0	3.0
6	张又莉	郧阳医学院附属人民医院消化内科	1	4	1.0	1.0