新型内含肽介导PHB系统表达纯化PoIFN-α的研究

• 来源期刊: 宁夏大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 内含肽 聚β-羟基丁酸酯 猪α干扰素 表达纯化
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 264-268
• 分类号: Q789
• 字数: 4343字
• 语种: 中文

摘要

为简化猪α干扰素蛋白(PoIFNα)的纯化步骤,以蛋白质自切割元件内含肽(Intein)替代蛋白酶,并以细菌自身产生的聚β-羟基丁酸酯(PHB)颗粒替代亲和配基,构建了新型内含肽介导PHB纯化PoIFNα的体系.结果显示,构建的基因工程大肠杆菌系统可成功实现PoIFNα的表达和纯化;φ(乳酸钠)=2.7%时,比较适宜工程菌的PHB累积;当诱导自切割反应温度为20℃,pH=6.5,反应时间为24~36h时,可以实现内含肽C端高效自切割,纯化出的PoIFNα产量为20~30mg/L.实验为重组猪α干扰素的工业化规模生产奠定了基础.