犬腺病毒2型抗原的制备及间接ELISA的建立

• 作者: 刘家森 司昌德 姜骞 曲连东 林欢 葛艳华 郭东春
• 来源期刊: 实验动物科学
• 学科: 农学
• 关键词: 犬2型腺病毒 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 40-44
• 分类号: S852.65
• 字数: 4076字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-6179.2010.05.012

摘要

用MDCK细胞增殖犬腺病毒2型弱毒疫苗株,病毒培养上清液经差速离心和酒石酸钾密度梯度离心浓缩、纯化后作为诊断抗原,建立了犬腺病毒2型抗体检测的间接ELISA.确定最佳抗原包被量为0.168μg/孔,待检血清最佳稀释倍数为1:100,作用时间为60 min,羊抗犬酶标抗体稀释倍数为1:2000,作用时间为60 min,底物作用时间为37℃,10 min.判定标准为S/P值≥0.351者判为阳性,S/P值≤0.318者判为阴性.该抗原不与犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬波特氏杆菌等3种犬常见传染病的阳性血清反应,具有良好的特异性;批内、批间重复试验,变异系数小于15%,显示具有较好的重复性;检测血清样品56份,与病毒中和试验结果比对的符合率为93.75%.本研究结果为实现犬腺病毒感染监测,进行犬腺病毒流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法.