靶向转酮醇酶样基因1 siRNA表达载体的构建及鉴定

• 作者: 张德太 杨菊红 胡丽华 蔡鹏程
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: siRNA 转酮醇酶 转酮醇酶样基因1 人结肠癌细胞株LoVo
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 基础实验诊断研究
• 页码范围: 128-130
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

目的 构建针对转酮醇酶样基因1(TKTL 1)特异性小干扰RNA(siRNA)真核表达载体并检测其沉默效应.方法 采用人U6 SnRNA启动子,分别把被9 bp序列间隔的19 bp长短的TKTL1靶序列的反向重复序列,置于pEGFP-C1-U6质粒载体中,构建成TKTL1短发央环RNA,产生重组质粒pEGFP-C1-U6/TKTL1,分别用PstⅠ和SalⅠ酶切鉴定及测序分析,并将重组质粒转染人结肠癌细胞株LoVo,通过RT-PCR检测TKTL1基因表达水平的变化.结果 酶切鉴定与DNA测序分析证明,TKTL1基因的siRNA表达载体构建正确,RT-PCR结果表明转染重组质粒的LoVo细胞TKTL1基因的表达水平明显降低.结论 成功构建了针对TKTL1基因的siRNA表达载体,转染LoVo细胞后可显著抑制TKTL1基因表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡鹏程		19	44	4.0	5.0
2	胡丽华		219	1037	13.0	23.0
3	张德太		44	314	10.0	16.0
4	杨菊红		6	9	2.0	2.0