乙脑病毒prME蛋白与鼠GM—CSF编码基因的融合构建与表达

• 作者: 冯国和 周言 翟永贞 马力
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 脑炎病毒 日本 病毒蛋白质类 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 CHO细胞
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 706-709
• 分类号: R512.32
• 语种: 中文

摘要

目的构建乙脑病毒prME蛋白与鼠GM-CSF融合基因重组子并建立稳定细胞表达株。方法套式-RT—PCR法从BALB／c鼠脾组织获取GM＋CSF编码基因，用限制性内切酶从含乙脑病毒wME蛋白基因重组子获取prME蛋白基因，定向克隆至同-真核表达载体pcDNA3．1（＋）不同酶切位点，构建重纽子pJME／GM—CSF并经酶切及DNA测序分析。脂质体法将pJME／GM—CSF转染中华仓鼠卵巢（CHO）N胞。Western blot法检测转染的CHO细胞中融合蛋白表达。结果pJME／GM—CSF经BamHI／EcoRI和BamHI／NotI酶切释出的插入子片段（2001bp、2472bp）分别与预期结果相符合。所编码的融合蛋白相对分子量（Mr）为85×103。结论pJME／GM-CSF成功构建，转染的CHO细胞可稳定表达融合蛋白。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯国和	中国医科大学附属盛京医院感染科	88	426	12.0	16.0
2	马力	中国医科大学附属盛京医院感染科	49	473	12.0	20.0
3	翟永贞	中国医科大学附属盛京医院感染科	25	42	4.0	5.0
4	周言	中国医科大学附属盛京医院感染科	9	14	2.0	3.0