快速检测A型流感病毒的TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法的建立

• 作者: 于海 周艳君 张善瑞 李国新 王斌 童光志 闫丽萍 马继红
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: A型流感病毒 TaqMan探针 实时荧光定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 1-7
• 分类号: S852.659.5|Q78
• 字数: 4898字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2010.03.001

摘要

根据A型流感病毒基质蛋白(matrix protein,M)基因保守序列设计并合成特异性引物和TaqMan BHQ探针,建立快速检测A型流感病毒的实时荧光定量RT-PCR方法.通过RT-PCR方法克隆A型流感病毒M基因靶序列并将其连入pMD-18T载体,制备阳性标准品,优化反应条件,以10倍系列稀释的标准品绘制标准曲线,其相关系数为0.998.检测结果显示,该方法的灵敏度可达10 copies/μL或1 EID50病毒且特异性良好,除A型流感病毒外,对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪输血传播病毒检测结果均为阴性.该方法重复性好,批内和批间变异系数均小于3%.对40份实验感染样品的检测结果表明,该方法与病毒分离结果一致,比常规RT-PCR检测方法灵敏度更高,特异性更强.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	童光志	中国农业科学院上海兽医研究所	168	2158	24.0	40.0
2	周艳君	中国农业科学院上海兽医研究所	54	442	10.0	19.0
3	李国新	中国农业科学院上海兽医研究所	29	408	10.0	20.0
4	闫丽萍	中国农业科学院上海兽医研究所	11	435	6.0	11.0
5	王斌	中国农业科学院上海兽医研究所	26	101	6.0	8.0
6	于海	中国农业科学院上海兽医研究所	18	89	6.0	8.0
7	马继红	中国农业科学院上海兽医研究所	8	24	3.0	4.0
8	张善瑞	中国农业科学院上海兽医研究所	2	8	2.0	2.0