人Prohibitin 2哺乳动物细胞株的转染表达与定位的初步研究

• 作者: 刘晓颖 朱恒锐 武标 汪云飞 范礼斌 邢昕
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 基因表达 转染 印迹法,蛋白质
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: R341|R394.2
• 字数: 2565字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2010.01.002

摘要

目的 构建带FLAG标签的人类野生phb2 (prohibitin 2)表达载体,将其转染至HEK 293T细胞检测其表达,转染至COS7细胞观察phb2蛋白在细胞内的定位.方法 以含有人phb2全长cDNA序列的质粒为模板,通过带有FLAG标签上游引物,用PCR方法扩增phb2全长序列,然后插入真核表达载体pCDNA3中构建pCDNA3-FLAG-phb2表达载体,将构建的质粒转染至HEK 293T细胞,提取总蛋白,进行Western blot检测;转染至COS7细胞,在荧光显微镜下观察其细胞定位.结果 成功构建了pCDNA3-FLAG-phb2表达载体,转染表明此表达载体在HEK 293T细胞中能够有效表达,在COS7细胞中phb2呈斑点状主要在胞质内分布,细胞核中未见到明显的表达.结论 实验结果为进一步了解phb2的功能提供了一定的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范礼斌	安徽医科大学生物教研室	53	174	8.0	9.0
2	刘晓颖	安徽医科大学生物教研室	57	121	6.0	8.0
3	邢昕	安徽医科大学生物教研室	4	10	1.0	3.0
4	武标	安徽医科大学生物教研室	5	10	1.0	3.0
5	朱恒锐	复旦大学遗传工程国家重点实验室	2	11	2.0	2.0
6	汪云飞		1	9	1.0	1.0