人MT2A基因在哺乳动物细胞株中的定位与表达

• 作者: 刘君 刘晓颖 李新颖 潘林鑫 耿慧武 范礼斌
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 金属硫蛋白 细胞定位 转染 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 232-235
• 页数: 4页
• 分类号: R341|R394.2
• 字数: 2545字
• 语种: 中文

摘要

目的 用基因克隆方法构建带FLAG-tag的人金属硫蛋白2A(MT2A)真核表达载体,用其转染HEK 293T,COS-7细胞观察MT2A在增殖细胞内的表达和定位.方法 设计带FLAG-tag的引物,以人MT2A全长cDNA序列的质粒为模板,PCR法扩增MT2A全长序列,然后插入pCDNA 3.1中构建pCDNA 3.1-MT2A-FLAG质粒;将构建的质粒转染至HEK 293T细胞,提取总蛋白,进行Western blot检测;脂质体法转染至COS-7细胞,荧光显微镜下观察MT2A表达的蛋白在细胞内定位.结果 正确构建了pCDNA 3.1-MT2A-FLAG质粒;其在HEK 293T细胞中能有效地表达;免疫荧光实验表明在COS-7细胞中,MT2A主要分布在细胞质内.结论 该研究结果为了解MT2A 在细胞内与其他蛋白质相互作用及功能提供了一定的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范礼斌	安徽医科大学生命科学学院生物学教研室	53	174	8.0	9.0
2	刘君	安徽医科大学生命科学学院生物学教研室	4	13	2.0	3.0
3	耿慧武	安徽医科大学生命科学学院生物学教研室	17	37	3.0	5.0
4	刘晓颖	安徽医科大学生命科学学院生物学教研室	57	121	6.0	8.0
5	潘林鑫	安徽医科大学生命科学学院生物学教研室	19	40	3.0	5.0
6	李新颖	安徽医科大学生命科学学院生物学教研室	4	14	2.0	3.0