猪α干扰素在毕赤酵母中的高效表达和纯化

• 作者: 刘蔓雯 叶伟成 张存 张燕 王一成 袁秀芳
• 来源期刊: 浙江农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪α干扰素 毕赤酵母 分泌表达
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 6-9
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2714字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1524.2010.01.002

摘要

为了研制新型的猪用抗病毒制剂,开展了猪α干扰素(PoIFNα)在毕赤酵母中的表达和产物纯化研究.将PCR扩增的PoIFNα基因插入pPIC9k的SnaB I和EcoR I位点.构建了表达转移载体pPIC9k/POIFNα;经酶切和测序鉴定,转移载体构建正确.pPIC9k/PoIFNα以限制性内切酶Sal I线性化后电转化毕赤酵母GSll5菌株,经抗性筛选获得4拷贝PoIFNα基因的重组菌株GSll5/PoIFNα;重组菌株经BMMY培养基诱导后上清中有目的蛋白,表达量达136 mg/L.表达产物经过SP-Sepharose阳离子交换层析,可以得到纯度较高的rPOIFNα,纯化产物在MDBK细胞上抑制VSV的活性高达2.27x10~8U/mg.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张存	浙江省农业科学院畜牧兽医研究所	42	177	7.0	10.0
2	叶伟成	浙江省农业科学院畜牧兽医研究所	27	143	6.0	10.0
3	王一成	浙江省农业科学院畜牧兽医研究所	61	386	11.0	16.0
4	袁秀芳	浙江省农业科学院畜牧兽医研究所	65	353	11.0	15.0
5	刘蔓雯	浙江省农业科学院畜牧兽医研究所	10	85	5.0	9.0
6	张燕	浙江省农业科学院畜牧兽医研究所	6	59	5.0	6.0