共表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因和猪瘟病毒E2基因的重组腺病毒的构建及其在小鼠模型上的免疫原性分析

• 作者: 仇华吉 孙元 常天明 李宏宇 贺番 黄俊华
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 重组腺病毒 免疫原性
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 161-166
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4998字
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在以复制缺陷型人5型腺病毒为载体,构建一株同时表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株GP5蛋白和猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白的重组腺病毒疫苗.首先利用重叠PCR将GP5和E2基因通过口蹄疲病毒(FMDV)2A序列连接,形成一个完整的ORF,并将其克隆到腺病毒穿梭载体中,通过细茵内同源重组构建共表达PRRSV GP5蛋白和CSFV E2蛋白的重组腺病毒(rAdV-GP52AE2).间接免疫荧光试验和western blot检测证实2个外源基因均获得表达.在小鼠上进行的免疫效力评价结果显示,rAdV-GP52AE2免疫组针对CSFV的中和抗体滴度可达1:128,针对PRRSV的中和抗体滴度为1:16;在淋巴细胞增殖试验中,免疫组与阴性对照组在增殖指数上有显著差异,表明该重组腺病毒可以同时诱导抗PRRSV和CSFV的特异性体液免疫和细胞免疫.这些结果显示,利用具有自动剪切功能的FMDV 2A多肽构建的重组腺病毒有望开发成一种同时预防PRRS和CSF的新型载体疫苗.