转染杜氏盐藻14-3-3基因对食管鳞癌EC9706细胞Bcl-2和Caspase-9蛋白表达的影响

• 作者: 李杰 王莉莉 薛乐勋 许培荣 魏攀
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 杜氏盐藻 14-3-3基因 食管鳞癌 Bcl-2 Caspase-9
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 食管癌研究
• 页码范围: 4-8
• 页数: 5页
• 分类号: Q789
• 字数: 3132字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2010.01.002

摘要

目的:探讨转染杜氏盐藻14-3-3基因对食管鳞癌EC9709细胞Bcl-2和Caspase-9蛋白表达的影响.方法:将杜氏盐藻14-3-3基因cDNA序列分别亚克隆入表达载体pEGFP-C1和pcDNA3.1(+)的Hind Ⅲ和Bam H Ⅰ位点,构建真核表达载体pEGFP-C1-14-3-3和pcDNA3.1(+)-14-3-3,采用脂质体方法转染EC9706细胞,同时设立空载体对照和空白对照,荧光显微镜观察pEGFP-14-3-3融合蛋白在EC9709细胞中的定位;G-418筛选稳定转染pcD-NA3.1(+)-14-3-3的细胞株,采用RT-PCR和Western blotting法检测14-3-3基因的表达;Western blotting检测3种细胞中Bcl-2和Caspase-9蛋白的表达.结果:pEGFP-14-3-3融合蛋白定位于EC9706细胞的细胞核;通过G-418筛选,最终获得稳定表达盐藻14-3-3基因的转染细胞株;与转染空载体和空白对照的EC9706细胞相比,转染pcDNA3.1(+)-14-3-3的EC9706细胞中Bcl-2蛋白表达量明显增高[(1.60±0.20)、(0.90±0.15)和(2.40±0.10);F=69.889 7,P＜0.001],而Caspase-9蛋白表达量明显降低[(1.00±0.04)、(1.40±0.08)和(0.40±0.05);F=217.066 7,P＜0.001].结论:杜氏盐藻14-3-3基因可能在EC9706细胞凋亡过程中发挥了抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李杰	郑州大学生物系细胞生物学研究室	210	1092	15.0	21.0
2	薛乐勋	郑州大学生物系细胞生物学研究室	140	1187	18.0	26.0
3	许培荣	郑州大学生物系细胞生物学研究室	40	265	11.0	15.0
4	王莉莉	郑州大学生物系细胞生物学研究室	27	99	5.0	9.0
5	魏攀	郑州大学生物系细胞生物学研究室	1	1	1.0	1.0