FasL基因重组慢病毒载体感染SD大鼠树突状细胞的研究

• 作者: 乐克平 孙晓磊 孙晓青 陈仁富 陈伟
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: FasL基因 重组慢病毒载体 树突状细胞 移植免疫耐受
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 493-498
• 分类号: R318.06
• 字数: 4635字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2010.06.005

摘要

目的 探讨FasL基因重组慢病毒载体感染SD大鼠树突状细胞的效率和FasI 蛋白的表达情况,为进一步研究转FasL基因在同种异体器官移植中诱导免疫耐受和保护移植物打下基础.方法 将培养一周的细胞重铺于六孔板中,每孔细胞数量为5×105,24 h后观察,细胞适合感染,按照MOI=10感染细胞,使用GFP阳性对照质粒作对照实验,感染24 h后,培养皿中添加1 ml新鲜培养基,每隔1 d加细胞因子继续培养,荧光显微镜观察荧光强度和数量,添加病毒液后10 d收集细胞进行实时定量检测和WB检测.结果 FasL基困重组慢病毒载体感染DC 8 d后,细胞开始出现荧光,10 d感染效率为100%;实时定量PCR检测瞬时转染后目的 基因的表达显示以细胞的1.00%为参照,Cell+FasL质粒为167.03%;免疫印迹检测转染后FasL蛋白的表达显示以细胞的1.00%为参照,细胞+FasL质粒为34.15%.结论 FasL基因重组慢病毒载体成功感染DC,实时定量PCR及Western印迹证实感染的Dc表达FasL明显提高.为进一步研究转FasL摹因在同种异体器官移植中诱导免疫耐受和保护移植物打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙晓青	徐州医学院附属医院泌尿外科	99	359	9.0	14.0
2	陈仁富	徐州医学院附属医院泌尿外科	59	131	6.0	7.0
3	陈伟	徐州医学院附属医院泌尿外科实验室	30	136	5.0	10.0
4	孙晓磊	徐州医学院附属医院泌尿外科实验室	23	74	5.0	6.0