白菜类富含亮氨酸重复(LRR)抗病蛋白基因BcLRR cDNA克隆及其介导的植物软腐病抗性分析

• 作者: 姚磊 崔崇士 朱朗 谢华 贾云鹤 陈绪清 马荣才
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大白菜 BcLRR cDNA克隆 遗传转化 软腐欧文氏菌抗性
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 416-423
• 分类号: S6
• 字数: 6117字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.03.002

摘要

利用前期构建的软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora subsp.carotovora)菌株BC1侵染诱导表达的大白莱(Brassica campestris subsp.pekinensis)SSH cDNA文库和cDNA芯片.在芯片分析的基础上,选取一个与拟南芥(Arabidopsis thaliana)类富含亮氨酸重复(LRR)抗病蛋白Cf-5高度同源的EST序列(GenBank登录号:DN962361)进行进一步分析.用5'-和3'-RACE方法克隆了该基因全长1 286 bp的cDNA序列,包含一个完整ORF和3'UTR,并具有Poly(A)加尾信号,将其命名为BcLRR基因(GenBank登录号:EU424347).BcLRR推导蛋白序列由327个氨基酸组成,除N端跨膜螺旋结构域外,大部分为LRR结构域,包含8个胞外LRR重复单元,由7个规范的LXXLXLXN结构和1个不规范LXXLXXXN组成.氨基酸序列比对分析发现,BeLRR蛋白与拟南芥类LRR抗病蛋白Cf-5同源性高达96.6%,与棉花(Gossypium hirsutum L.)类LRR抗病蛋白GhLRR同源性为82.3%,它们之间大部分变异限定在N端信号肽区.系统发育关系表明,在三种植物中功能均未知的这一蛋白属于一个新的胞外LRR蛋白类型,在结构上不同于其它抗性已知的胞外型LRR蛋白.将受CaMV 35S启动子驱动的BcLRR基因完整ORF序列转化拟南芥Col-0,PCR鉴定、Southern杂交和RT-PCR分析表明,BcLRR基因已整合到拟南芥基因组中,并在拟南芥中获得了转录.软腐病病情指数分析表明,转BcLRR植株提高了对软腐欧文氏菌的抗性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔崇士	东北农业大学园艺学院	119	1485	21.0	30.0
2	陈绪清	北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心	17	499	9.0	17.0
3	谢华	北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心	13	91	7.0	9.0
5	姚磊	北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心	9	98	6.0	9.0
9	朱朗	中国农业大学生物学院	1	7	1.0	1.0
10	贾云鹤	东北农业大学园艺学院	2	35	2.0	2.0