BCR/ABL和SEA双基因重组载体的构建和表达

• 作者: 周羽竝 李扬秋 林晨 查显丰 田红霞 高永鹏 黄欣
• 来源期刊: 暨南大学学报（自然科学与医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: BCR/ABL融合基因 金黄色葡萄球菌肠毒素A 慢性粒细胞白血病 DNA疫苗
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 336-340
• 分类号: R733.71
• 字数: 3839字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2010.04.002

摘要

目的:构建和表达含BCR/ABL融合基因和葡萄球菌肠毒素A(SEA)的真核双表达质粒.方法:利用RT-PCR技术从K562细胞中扩增出含BCR/ABL融合位点基因片段,提取金黄色葡萄球菌基因组DNA扩增出SEA基因,分别将两基因片段连在pIRES载体的多克隆位点A和B上,构建BCR/ABL-pIRES-SEA、SEA- pIRES-BCR/ABL重组质粒.将重组质粒转染K293细胞,RT-PCR鉴定重组质粒在真核细胞的转录情况, SDS-PAGE电泳鉴定目的蛋白在真核细胞的表达.结果:成功扩增出BCR/ABL和 SEA基因片段;双酶切鉴定BCR/ABL-pIRES-SEA、SEA-pIRES-BCR/ABL重组质粒中含有BCR/ABL和SEA基因,测序证实完全正确;将重组质粒转染K293细胞后,经 RT-PCR扩增鉴定,插入到重组质粒的BCR/ABL和SEA基因能在真核细胞正常转录,经SDS-PAGE电泳鉴定重组质粒能够在真核细胞中表达BCR/ABL和SEA蛋白.结论:成功构建BCR/ABL-pIRES-SEA、SEA-pIRES-BCR/ABL真核双表达质粒,可在真核细胞中正常转录并表达BCR/ABL和SEA蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李扬秋	暨南大学医学院血液病研究所	222	807	12.0	17.0
2	周羽竝	暨南大学医学院生化教研室	45	195	7.0	11.0
3	林晨	暨南大学医学院微免教研室	53	535	11.0	21.0
4	高永鹏	暨南大学医学院微免教研室	7	8	2.0	2.0
5	田红霞	暨南大学医学院微免教研室	7	11	2.0	2.0
6	查显丰	暨南大学医学院血液病研究所	19	59	5.0	6.0
7	黄欣	暨南大学医学院血液病研究所	9	17	2.0	3.0