蛋白酶体激活因子REGγ的重组表达及其体外功能的初步探讨

• 作者: 吴敏 张令强 汪渊 聂晶
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组表达 质粒 蛋白酶体激活因子REGγ 酪蛋白激酶-2相互作用蛋白-1 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-7,11
• 页数: 4页
• 分类号: Q556
• 字数: 3533字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2010.01.002

摘要

目的 蛋白酶体激活因子11S调节蛋白复合物γ亚单位(11S regulator complex gamma subunit,REGγ)的重组表达,初步探讨其与骨形成负调控分子酪蛋白激酶-2相互作用蛋白-1(casein kinase-2 interacting protein-1,CKIP-1)的相互作用.方法 首先以质粒pCMV-Myc-REGγ为模板,通过聚合酶链反应(PCR)扩增出765 bp的REGγ cDNA片段,然后亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-2并转化入大肠杆菌BL21经IPTG诱导表达,表达产物超声破碎后进行SDS-PAGE和Western印迹鉴定,进而通过GST Pull-down实验验证REGγ是否与CKIP-1存在相互作用.结果 通过测序证实原核表达载体pGEX-4T-2-REGγ构建成功,进一步表达鉴定发现GST-REGγ蛋白主要以可溶性的形式存在于裂解上清中;GST Pull-down实验表明REGγ与CKIP-1存在明显的相互作用.结论 REGγ与CKIP-1在体外存在相互作用,为进一步深入研究REGγ对CKIP-1的调控作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪渊	安徽医科大学分子生物学实验室和生物化学与分子生物学教研室	103	520	11.0	15.0
2	吴敏	安徽医科大学分子生物学实验室和生物化学与分子生物学教研室	10	29	3.0	5.0
3	张令强	安徽医科大学分子生物学实验室和生物化学与分子生物学教研室	7	2	1.0	1.0
7	聂晶		1	1	1.0	1.0