狂犬病病毒核蛋白在Bac-To-Bac/AcMNPV杆壮病毒系统的表达

• 作者: 周继勇 尹伟 张金阳 徐洁萍 颜焰
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 狂犬病病毒 核蛋白基因 Bac-To-Bac/AcMNPV杆状病毒表达系统.
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 86-89,115
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659
• 字数: 3698字
• 语种: 中文

摘要

为真核表达狂犬病病毒的核蛋白,本研究通过RT-PCR克隆狂犬病病毒ERA株核蛋白基因,将其克隆于杆状病毒转移载体pFastBacHTB中,构建重组质粒pFastBacHTB-NP并将其转化DH10Bac细胞,得到重组穿梭质粒reBacmid-NP;通过转染昆虫细胞sf9包装重组杆状病毒.SDS-PAGE、western blot和间接免疫荧光对表达的蛋白进行鉴定和反应原性分析.分别以重组杆状病毒表达的核蛋白、原核表达核蛋白为包被抗原进行ELISA检测.结果表明,在昆虫细胞中表达的狂犬病病毒重组核蛋白能与鼠抗RV核蛋白单克隆抗体和RV阳性血清特异性结合,其相对分子量约为50.5 ku.以重组杆状病毒表达的核蛋白为抗原建立的rNP-ELISA的敏感性、特异性、符合率分别为86.36%,89.83%,90.00%,优于大肠杆菌表达的RV核蛋白.说明杆状病毒系统表达的核蛋白是建立RV核蛋白ELISA抗体检测方法的理想抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周继勇	浙江大学农业部动物疫病病原学与免疫控制重点开放实验室	86	753	16.0	23.0
2	尹伟	浙江大学农业部动物疫病病原学与免疫控制重点开放实验室	12	19	3.0	4.0
3	颜焰	浙江大学农业部动物疫病病原学与免疫控制重点开放实验室	12	25	2.0	4.0
4	徐洁萍	浙江大学农业部动物疫病病原学与免疫控制重点开放实验室	2	9	1.0	2.0
5	张金阳	浙江大学农业部动物疫病病原学与免疫控制重点开放实验室	2	9	1.0	2.0