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针对DEK原癌基因的siRNA真核表达载体的构建
针对DEK原癌基因的siRNA真核表达载体的构建
作者:
冯天达
刘岿然
张淑兰
杨雨
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
宫颈癌
DEK
RNA干扰
转染
摘要:
目的 以DEK基因为靶基因,针对其特定核苷酸序列,构建psiRNA-hHDEK表达载体,转染宫颈癌CaSki细胞,观察DEK siRNA对DEK基因mRNA转录水平和蛋白表达水平的靶向沉默效应.方法 根据DEK核苷酸序列,利用软件设计出针对DEK位点的特异性小干扰RNA,克隆至siRNA真核表达载体psiR-NA-hHlneo中,构建能在真核细胞中表达的靶向DEK基因的siRNA重组质粒;应用脂质体介导重组质粒转染宫颈癌CaSki细胞株,用RT-PCR和Western Blot检测转染后DEK mRNA和蛋白表达.结果 筛选出阳性克隆,抽提质粒,经限制性内切酶AseI酶切鉴定及测序分析证实合成的siRNA序列正确,并已准确克隆入psiRNA-hHl neo我体中.DEK特异性siRNA栽体构建成功.经RT-PCK和Western Blot测定分析,转染质粒psiRNA-hHDEK CaSki细胞组DEK mRNA和蛋白的表达明显减少.结论 成功构建了DEK特异性siRNA表达载体.设计构建的真核表达载体可以特异性干扰DEK原癌基因的表达,为进一步研究DEK基因的功能奠定了基础.
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文献信息
篇名
针对DEK原癌基因的siRNA真核表达载体的构建
来源期刊
中国现代医学杂志
学科
医学
关键词
宫颈癌
DEK
RNA干扰
转染
年,卷(期)
2010,(20)
所属期刊栏目
研究方向
页码范围
3053-3056
页数
4页
分类号
R711.74|R737.33
字数
3001字
语种
中文
DOI
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
张淑兰
中国医科大学盛京医院妇产科
319
1930
19.0
29.0
2
冯天达
中国医科大学盛京医院神经外科
28
51
3.0
5.0
3
刘岿然
中国医科大学盛京医院妇产科
47
193
8.0
11.0
4
杨雨
中国医科大学盛京医院妇产科
6
25
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研究主题发展历程
节点文献
宫颈癌
DEK
RNA干扰
转染
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国现代医学杂志
主办单位:
中南大学
中南大学肝胆肠外科研究中心
出版周期:
半月刊
ISSN:
1005-8982
CN:
43-1225/R
开本:
大16开
出版地:
湖南省长沙市湘雅路87号
邮发代号:
42-143
创刊时间:
1991
语种:
chi
出版文献量(篇)
24199
总下载数(次)
6
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