借助慢病毒将EGFP基因导入西藏小型猪胎儿成纤维细胞

• 作者: 姚志芳 张晟 肖东 肖高芳 贾俊双 那顺巴雅尔 顾为望 黄黎珍
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒 西藏小型猪胎儿成纤维细胞(PEFs) 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 34-36,55,后插2
• 页数: 5页
• 分类号: R332
• 字数: 2987字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2010.04.008

摘要

目的 借助慢病毒将EGFP基因导入西藏小型猪胎儿成纤维细胞(porcine embryonic fibroblasts, PEFs), 以基于PEFs建立慢病毒介导的外源基因体外投递系统.方法 取35 d西藏小型猪胚胎,酶消化法分离培养西藏小型猪的PEFs; 按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒(携带EGFP基因)包装(脂质体介导的瞬时转染),随后用病毒上清感染PEFs,24～48 h后荧光显微镜下观察是否见绿色荧光以证实慢病毒是否成功生产和成功感染PEFs.结果 成功分离培养西藏小型猪的PEFs,按标准程序生产的携带EGFP基因慢病毒高效率感染西藏小型猪的PEFs.结论 针对西藏小型猪的PEFs建立了相应的慢病毒介导的外源基因体外投递系统,为相关后续研究打下了良好基础.